PCR是聚合酶鏈式反應的簡稱。

是一種分子生物學技術，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統，能迅速掌握患者體內的病毒含量，其精確度高達納米級別，精確檢測乙肝病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據。

臨床基因擴增檢驗實驗室又稱分子實驗室、PCR實驗室。已逐漸成為檢驗領域必不可少的一部分，原則上臨床基因擴增檢驗實驗室應當設置以下區域：試劑儲存和準備區、標本制備區、擴增區、擴增產物分析區。

這4個區域在物理空間上必須是完全相互獨立的，各區域無論是在空間上還是在使用中，應當始終處于完全的分隔狀態，不能有空氣的直接相通。

二、PCR實驗室平面設計布局

PCR擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區域：試劑貯存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。為避免交叉污染，進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行，即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。 各實驗區之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。

臨床PCR實驗室設計的“16字口訣”：各區獨立、注意風向、因地制宜、方便工作。

(1)在物理空間上，必須是完全相互獨立的，各 區域無論是在空閑還是在使用中，應始終處于 完全的分隔狀態; (2)不能有空氣的直接相通。

理想的PCR實驗室設計A

理想的PCR實驗室設計B

平面設計圖示

三、PCR實驗室建設

臨床基因擴增檢驗實驗室需要依據《醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》、《實驗室生物安全通用要求》、《生物安全實驗室建筑技術規范》等相關規定進行規劃建設。

1、二級生物安全實驗室的裝修

根據《人間傳染的病原微生物名錄》， PCR實驗室所操作致病性生物因子大多屬于第二類病原微生物，實驗活動所需生物安全實驗室級別的生物危害等級為BSL-2。列舉裝修要點如下：

1、實驗室墻壁、頂板和地板應當光滑、易清潔、防滲漏并耐化學品和消毒劑的腐蝕。地面應防滑，不得在實驗室內鋪設地毯和懸掛窗簾。實驗室的墻體，包括頂棚，應結構牢固、氣密性好、所有陰角采用圓弧形線條過渡；墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；墻體和吊頂建議使用彩鋼板。

2、地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

3、燈具要選用凈化燈具，能達到便于清洗、不積塵的特點。實驗室應設應急照明裝置，同時考慮合適的安裝位置，以保證人員安全離開實驗室。

4、有可靠的電力供應和應急照明。每個房間必須裝有紫外線殺菌燈，殺菌燈的安裝高度在1.8～2.1m之間。

5、傳遞窗內部安裝有紫外燈，供消毒用。

6、應配備足夠的固定電源插座，避免多臺設備使用共同的電源插座。應有可靠的接地系統，應在關鍵節點安裝漏電保護裝置或監測報警裝置。

7、實驗室臺(桌)柜和座椅等應穩固和堅固，邊角應圓滑。實驗臺面應防水，并能耐受熱、有機溶劑、酸堿、消毒劑及其他化學劑。一般采用環氧樹脂臺面。

8、實驗臺中的櫥柜和實驗臺應牢固，實驗臺、柜和其他設備之間應保持一定距離，以便清潔。

9、實驗室門為凈化門，應有可視窗并帶自動閉門器，實驗室的門與門不能相對開啟，必須錯位開啟。并達到適當的防火等級，門鎖及門的開啟方向應不妨礙室內人員逃生。

10、實驗室應設洗手池，水龍頭開關宜為非手動式，宜設置在靠近出口處。

11、給水管道應設置倒流防止器或其他有效的防止回流的裝置；給排水系統應不滲漏，下水應有防回流設計。

12、應配備適用的應急器材，如消防器材、意外事故處理器材、急救器材等。

13、應配備適用的通訊設備。

實驗室的建設有布局、工程材料、通風系統、排風系統、壓力梯度、建筑工藝等幾個關鍵點，總結如下：

墻面：主體結構建議使用彩鋼板圍護，墻面光潔、不產塵積塵、耐腐蝕，易清潔、無縫隙；

地面：建議使用PVC卷材，、耐腐蝕、無縫隙、無滲漏；

陰陽角：均采用圓弧角密封處理，不易積塵；

傳遞窗：必須設置互鎖(機械或電子)；

主入口：實驗室主入口設有門禁管理；

通風系統：避免交叉污染；

排風系統：宜設置高效過濾器凈化；

氣流組織：采用上送下排形式；

壓力梯度：壓力梯度控制通過微壓差計及精密自控系統控制；

排水系統：排水系統應不滲漏，下水應有防回流設計。

應急用電：應有緊急發電設備或雙回路供電。關鍵設備應配備足夠的UPS并接入設備。

防護設施：設置洗眼裝置，必要時應有應急噴淋裝置；設置非接觸式操作理念(感應式水龍頭、感應式自動門、互鎖傳遞窗等)。

2、工程材料列表（列舉部分）

3、PCR實驗室的設備表（根據具體項目調整）

試劑儲存和準備區  (PCR 1區)

功能：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。

標本制備區（PCR 2區）

功能：核酸（RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴增反應管。對于涉及臨床樣本的操作，應符合生物安全二級實驗室防護設備、個人防護和操作規范的要求。

擴增區（PCR 3區）

功能：DNA擴增及檢測。

產物分析區 （PCR 4區）

功能：擴增片段的進一步分析測定，如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等。(開展項目不同對應不同儀器)

4、PCR實驗室合并情況

PCR不同區域可合并情況（一）

場景：使用實時熒光PCR儀

依據：衛生部辦公廳關于印發《醫療機構臨床基因擴增管理辦法》的通知；醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則；衛辦醫政發〔2010〕194號

合并：擴增區、擴增產物分析區可合并

PCR不同區域可合并情況（二）

場景：采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀

依據：衛生部辦公廳關于印發《醫療機構臨床基因擴增管理辦法》的通知；醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則；衛辦醫政發〔2010〕194號

合并：標本制備區、擴增區、擴增產物分析區可合并。

四、PCR項目服務與工作開展

1）確認意向，簽訂合同：客戶需求了解，項目效益評估，裝修現場條件評估。

2）建設規劃，布局設計：指導分區布局設計和平面布置，裝修現場專業評估。

3）籌建及施工：施工和設施安裝指導。

4）實驗室儀器設備配置：根據項目需求提供設備清單，協助/完成采購。

5）實驗室布置：分區標識指導，物品布置指導。

6）人才技能培訓：專業技術培訓（可與實驗室布置同步進行）

7）實驗室驗收：指導質量體系搭建、指導驗收前準備、協助驗收申辦、驗收過程陪同等。

儀器、試劑要求

儀器：必須三證齊全

試劑：必須NMPA批準

項目：新開展檢測項目應有相應臨床科室出具的評估報告；在技術審核前應進行方法學驗證

實驗人員要求

必須持有PCR上崗合格證，PCR 實驗室操作人員至少2名；

通過參加省臨床檢驗中心組織的臨床基因擴增實驗室技術人員上崗培訓班獲得上崗證，培訓班內容包括理論培訓和實驗培訓。

需要具備資格、培訓、技能與業績檔案

需要有培訓記錄及實施記錄：每人需有年度培訓內容（包括外出學習、進修、內部質量手冊學習、業務學習及新項目開展學習等）。